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血清钙(ca2 ,ca)

血清钙(ca2,ca)是检查血清中钙离子浓度的试验。人体内的钙99%以上存在于骨骼和牙齿中。血液中的钙绝大部分存在于血浆中,血浆钙有非扩散性钙及扩散性钙两部分。非扩散性钙与蛋白质结合(大约1g蛋白质结合0.87mg的钙),约占血浆总钙的40%~50%,扩散性钙主要为离子钙(Ca2+),还有小部分的钙盐(如柠檬酸钙,其他有机酸钙盐及碳酸氢钙等)。非扩散性钙与扩散性钙之间受H+浓度和HCO3-浓度的影响,在生理状态下保持平衡。

成人2.1~2.75毫摩/升(8.5~11.0毫克/分升)。

儿童2.25~3.0毫摩/升(9.0~12.0毫克/分升)。

1、增高见于甲状旁腺功能亢进甲状旁腺肿瘤、维生素D摄入过多、多发性骨髓瘤、肿瘤骨转移、急性骨萎缩。

2、减少见于婴儿手足搐搦症甲状旁腺功能减退骨质软化症、钙及维生素D吸收不良或不足(佝偻病、腹泻、妊娠后期等)、阻塞性黄疸急性出血性胰腺炎、肾脏疾病(如慢性肾炎、尿毒症)、碱中毒以及脱水和酸中毒纠正后(常出现低血钙)。此外,引起血清白蛋白减少疾病如恶性肿瘤、严重肝病、黑热病等亦可降低血钙。

结果偏低可能疾病:

新生儿低钙血症、巨人症及肢端肥大症、肌肉痉挛

1、甲基百里香酚蓝比色法(MTB):

(1)MTB与EDTA有相似的氨羧结构,能螯合多种阳离子,但络合稳定常数不同。

(2)加入:EDTA的作用,目的在于掩蔽试剂中污染的钙以及其他的金属离子。能降低空白管吸光度,提高测定管吸光度,从而使方法灵敏度提高。

(3)EDTA的用量选择,绝大部分金属离子与EDTA的络合稳定常数大于钙,小于钙的仅是少数微量元素。限量的EDTA仅能掩蔽试剂中的干扰元素,没有多余的EDTA络合血清钙,一般加入配试剂中的浓度EDTA99~108μmol/L,最终络合显色反应的EDTA浓度50~54μmol/L。

(4)所用的试管清洗后用去离子水浸泡两次,再烤干备用。清洁管加入试剂后应显一致的浅灰绿色,若显蓝色则试管表示有钙污染。

2、邻甲酚酞络合酮直接比色法:

(1)本测定用血清或肝素抗凝血浆标本。不能用钙螯合剂(EDTA-Na2)及草酸盐抗凝剂的标本。

(2)邻甲酚酞是一种酸碱指示剂,在结构上与甲基百里香酚蓝相似,在中性或酸性环境中无色,仅在碱性溶液中和钙离子络合呈紫红色。所以pH对显色有很大的影响,在pH10.5~12时,此反应敏感性最好,故用pH11为宜。

(3)试剂中加入8-羟基喹啉消除镁的干扰,能特异地络合镁,TritonX-100具有消化蛋白的影响。有的作者,在试剂中还加入氰化物掩蔽其他金属离子;二甲亚砜消除蛋白影响及抑制邻甲酚酞络合物的解离,从而降低空白液的吸光度;聚乙烯吡咯烷酮亦能消除蛋白质、胆红质及磷的干扰。

(4)用来作血清钙测定的碱性缓冲液较多,可根据条件选用,常用的有乙二胺-氰化钾、乙二胺-醋酸钾-盐酸、乙二胺-乙二醇乙醇胺-硼酸、2-氨基-2-甲基-1-丙醇等。用乙二胺-乙二醇缓冲液测定呈色稳定。乙醇胺-硼酸缓冲容量较大,并能使空白试剂的吸光度保持较低读数。2-氨基-2-甲基-1-丙醇无毒,无刺激性,也能使空白管有较低的读数。

(5)显色剂有时略有结晶析出,是8-羟基喹啉在水中溶解度很低,易析出结晶所致,这时可取上清液应用。

3、乙二胺四乙酸二钠滴定法

(1)测定标本若有黄疸或溶血时,终点不易观察,则必须将标本进行处理,首先用草酸盐将钙沉淀,再用盐酸及柠檬酸钠重溶。

①尚需增加几种试剂:0.7mol/L草酸铵;0.05mol/L柠檬酸钠;1mol/L盐酸。

②按下法操作:吸取血清0.1ml,置于离心管中,加去离子水0.25ml、0.7mol/L草酸铵0.05ml,混匀。置56℃水浴中15min。离心沉淀2000转/分10min。小心倾去上清液,并将离心管倒立于滤纸上吸干。加1mol/L盐酸及0.05mol/L柠檬酸钠各0.1ml于离心管中,溶解沉淀。按直接滴定法进行滴定及计算。

(2)钙指示剂种类繁多,名称较乱,不同指示剂所显滴定终点不同,受其他离子干扰的作用也不一样,钙红指示剂终点明显,且较少受镁离子等干扰。但本身不稳定。要经常新鲜配置,加入标本内后要立即用EDTA-Na2滴定。所用钙红为钙-羧酸钠,应与乙二醛缩双邻氨基酚的别名“钙红”相区别。

4、离子钙测定:

(1)测定离子钙最好用血清。优点不参入抗凝剂,减少蛋白对电极的污染。肝素抗凝全血亦可用于离子钙测定,尤其急需要结果减少了凝血时间和离心分离血清的时间。但过量的肝素(30u/ml)能使离子钙浓度降低3%~5%。

(2)pH改变对Ca2+影响较大。pH降低能使Ca2+增加,反之能使钙离子减少,故采到的血标本尽可能防止CO2逸出,避免pH增加。

(3)标本应尽快测定,最好在采样后1h内完成。全血密封贮存于4℃冰箱可稳定6h或更长些时间。密封在注射器中的血清,若无气泡存在,室温可保存1~2h,4℃可保存24h以上。

(4)离子钙含量还与下列因素有关:

①站立能使离子钙增高约1%~2%。

②延长静脉淤血的时间能使离子钙增加2%,淤血时前臂运动几分钟离子钙可增加8%。

③卧床3~12天足以使离子钙超出正常范围。

离子钙测定:商品的离子钙分析仪所用的钙电极都采用中性载体作钙电极的活性材料制成聚氯乙烯(PVC)电极膜,电极的寿命约半年左右:pH电极特殊玻璃毛细管制成;参考电极采用银/氯化银制成。

各种型号的离子钙分析仪的试剂配方、试剂用量、操作方法有所不同,一般要进行下列步骤。本法以一种国产的离子钙分析仪为例。

1、接上电源,仪器首先进行显示及电子线路检测,结束后即可进行二点斜率定标。

2、斜率定标时,推出吸样针先后将其浸入盛有低、高二个浓度斜率定标仪的小瓶中,吸取斜率定标液,待仪器发出“嘟”声后移去。吸样针推回原处,仪器自动进行斜率定标。

3、定标通过后,可进行样品测量。

(1)毛细血管血测量:将毛细管血混匀,推出吸样针,取掉两端塞子,一头装上接头,将接头另一端装在取样针上,按“测量”键至样品完全充满样品测量腔后,再松开“测量”键,进样泵即停止工作。此时应检查样品测量腔内的样品是否有气泡,如有气泡存在,应在松开“测量”键8s内,再按“测量”键,继续吸取样品,直至排除气泡为止。移去样品,擦净吸样针并推回原位,在进样结束8s后即显示测量数据并打印结果。

(2)血清测量过程同全血测量。

4、标本测量结束,仪器冲洗管路和样品测量,冲洗好后即可进行下一个样品的测量。

5、在最后一次定标或血样测量结束后10min不操作仪器,仪器将进入“休眠”状态。此时如需进行血样测定,必须先进行一点定标。若没有血样测定,仪器每隔30min自动进行一次一点定标。

无检查适应症者不宜进行检查。

感染的风险:如果使用了不洁针头穿刺就有可能有感染的风险。


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