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氨基

氨基(Amino)是有机化学中的基本碱基,所有含有氨基的有机物都有一定碱的特性,由一个氮原子和两个氢原子组成。

氨基是有机化学中的基本碱基,所有含有氨基的有机物都有一定碱的特性,由一个氮原子和两个氢原子组成,化学式-NH2。如氨基酸就含有氨基,有一定碱的特性。氨基是一个活性大、易被氧化的基团。在有机合成中需要用易于脱去的基团进行保护。简单说几种:1、酰化保护,即用酸酐保护; 2、用苄基保护; 3、手性化合物常用CBZ,BOC,FMOC等保护氨基酸,氨基显正电性,是斥电子集团,在氨基酸合成多肽时,氨基能与羧基发生脱水缩合。

基本形式:(-NH2

实验原理

氨基移换酶也称转氨酶,它能催化α-氨基酸的氨基与α-酮酸的α-酮基互换,这种作用称为氨基移换作用。它在生物体内蛋白质的合成与分解等中间代谢中,在糖、脂肪、蛋白质三类物质代谢的相互联系、相互转化上,都起着很重要的作用。任何一种氨基酸进行转氨作用时,都由其专一的转氨酶催化。它们的最适pH接近7.4。在各种转氨酶中,以谷氨酸草酰乙酸转氨酶(简称谷草转氨酶、GOT)及谷氨酸丙酮酸转氨酶(简称谷丙转氨酶、GPT)活力最强。

试剂与器材

解剖器具、离心机、恒温水浴、干燥箱、台秤、层析系统等。

磷酸缓冲液(pH=7.4)、1%谷氨酸溶液(用KOH中和至中性)、1%丙酮酸溶液(用KOH中和至中性)、0.1%碳酸氢钾溶液、0.05%碘乙酸溶液、15%三氯醋酸溶液、标准丙氨酸溶液(0.1%)、标准谷氨酸溶液(0.1%)、0.1%水合茚三酮乙醇溶液、酚溶剂。

操作方法

将兔击晕,迅速解剖,取出肝脏,在低温条件下剪碎。称取匀浆后,离心取上清液,即为制备的酶液。体外氨基移换反应。纸上层析法检查每人4个点(标准丙氨酸溶液、标准谷氨酸溶液、对照上清液、样品上清液)。点样放入层析罩内。用被酚所饱和的水溶液,平衡后,用带小漏斗的玻璃管从层析罩上加饱合酚试剂25ml于层析缸内。然后,立即盖紧塞子,当溶剂前沿达到距滤纸上端约2.5cm处,取出滤纸,晾干或吹干,以除去酚溶剂,喷洒0.1%茚三酮乙醇溶液,放入烘箱中显色氨基酸与茚三酮的反应,在滤纸上呈现紫红色斑点。

关键步骤与注意事项

① 取动物新鲜组织制备酶液,防止酶失活。

② 加碘乙酸抑制酶解作用。 [1]

氨基膜是一种蕈要的生物过渡材料,在化学作用下,氨基膜被活化而具有固定生物分子的作用。使用氨基薄膜对材料表面修饰的研究越来越普遍。本文采用射频磁控溅射法制备金刚石薄膜,并使用磁过滤等离子体化学气相沉积法,对类金刚石薄膜进行表面氨摹改性,使其具有良好的生物兼容性,从而拓展其作为生物保护材料在生物传感器中的应用。

磁过滤等离子体化学气相沉积的实验装置由真空系统、放电系统、等离子体磁过滤系统以及外围电源组成。通过调节各项参数(氮气与氢气的体积比、励磁电流大小、沉积功率),控制对类金刚石膜表面进行氨基改性的工艺条件:励磁电流8 A;放电电压1.8 kV;放电电流2 mA;N2与H2的体积比为1:2,沉积气压:30 Pa;沉积时间:30 min。 [2]


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