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湿电转膜仪

湿电转膜仪是用来转印蛋白的仪器。转移蛋白最常用的是电泳转印方法,该技术具有快速、有效、并保持蛋白在凝胶中高分辨率的特性。电泳转印法是指在凝胶中分离的蛋白质向印迹膜载体转印的过程。由于该技术可以准确、快速、高效的将蛋白转印到膜上,并可以保持蛋白在凝胶中高的分辨率,而被广泛的应用于转移印迹技术中。

湿电转膜仪操作步骤:

(1) 转一张膜需准备2张6.5*10cm的滤纸和1张5.5*8.5cm的PVDF膜。切滤纸和膜时一定要戴手套,因为手上的蛋白会污染膜。将切好的PVDF膜浸于甲醇中不少于15s才可使用。

(2) 在加有转移液的搪瓷盘里放入转膜用的夹子、两块海绵垫、两张滤纸和浸过的PVDF膜。

(3) 打开夹子将黑的一面放入转膜液中,从下往上依次放入海绵、滤纸、分离胶、PVDF膜、滤纸、海绵。

注意:1 整个过程在转膜液中进行在铺每一层时要用刮子赶气泡,尤其是胶与膜之间一定不能留有气泡。

2 撬玻璃板剥胶时动作要轻,用刮子将浓缩胶轻轻刮去小心剥下分离胶盖于滤纸上,用手调整使其与滤纸对齐

(4) 将夹子合好,放到转移槽槽中,要使夹的黑面对槽的黑面,夹的白面对槽的红面。接通电电转移时会产热,在槽的一边有较大空隙,放入事先准备好的冰盒来降温。将整个电泳槽放入一个大的容器中(大的塑料泡沫盒子最好),在这个容器中盛满冰。


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